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SRT-C SEC Plus

SRT-C SEC Plus

  SRT-C SEC Plus色谱柱键合固定相采用专有表面修饰技术,以高纯度、机械稳定的硅胶为基质,表面键合均匀、亲水、中性的纳米级薄膜。专有表面工艺可精准控制薄膜形成,实现柱间高度重现。化学键合特性与薄膜最大键合密度赋予固定相优异稳定性,均匀表面涂层能够实现高效分离。SRT-C SEC Plus色谱柱采用专利匀浆装柱工艺,床层密度均匀稳定,确保柱效最大化。

  SRT-C SEC Plus填料为窄粒径分布的球形颗粒,粒径为5 μm,孔径为100 Å 、150 Å 、300 Å,具有极低的非特异性吸附,适用于生物大分子样品(如单抗、双抗、ADC以及重组蛋白等)及其他水溶性样品分析。

产品特点
  • 极低的非特异性吸附
  • 稳定的的批间重现性
  • 良好峰对称性和耐用性
  • 高的蛋白回收率,且蛋白不易失活
  • 适用于常规生物样品的分离与制备
图1.-SRT-C-SEC-300-Plus分离标准蛋白混合物.jpg

图1. SRT-C SEC-300 Plus分离标准蛋白混合物

流动相:150 mM Phosphate Buffer, pH 7.0

流速:1.0 mL/min

柱温: Ambient (~23° C)

检测波长:UV 214 nm

进样量:5 μL

样品:1)Thyroglobulin aggregate,1340KD; 2)Thyroglobulin,670 kD; 3)BSA dimer,132 kD; 4)BSA,66 kD; 5)Ribonuclease A,13.7 kD; 6)Uracil,120 D

图2.-SRT-C-SEC-300-Plus稳定的的批间重现性.jpg

图2. SRT-C SEC-300 Plus稳定的的批间重现性

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SRT-C SEC-300 Plus三个不同批次色谱柱测试利妥昔单抗的保留时间与峰面积的RSD分别为0.35%、0.84%,批间一致性良好

图3.SRT-C-SEC-300-Plus良好耐用性.jpg

图3.SRT-C SEC-300 Plus良好耐用性

进样 聚集体面积占比/% 单体理论塔板数 单体拖尾因子 单体和二聚体分离度
第1针 1.15 9556 1.11 1.97
第50针 1.16 9973 1.13 2.04
第100针 1.18 10386 1.12 2.07
第150针 1.16 9420 1.09 2.00
第200针 1.17 9637 1.07 2.00
第250针 1.18 9778 1.08 1.98
第300针 1.17 9902 1.07 2.03
第350针 1.16 9567 1.08 2.01
第400针 1.18 9293 1.08 1.98
RSD/% 0.94 3.40 2.04 1.62

经白蛋白样品测试,SRT-C SEC-300 Plus寿命测试400针柱效稳定,分离度无明显下降,拖尾无明显增加

图4.SRT-C-SEC-300-Plus分析单抗样品.jpg

图4.SRT-C SEC-300 Plus分析单抗样品

色谱柱:SRT-C SEC-300 Plus (5 μm, 300 Å, 7.8×300 mm)

流动相:50 mM PB+250 mM KCl, pH 6.2

流速:0.5 ml/min

检测器:UV280 nm

样品:单抗(1 mg/mL)

进样量:50 μL

RT (min) 峰面积 (mAU · s) 峰面积 % p/v 比 USP 分离度 USP 塔板数 拖尾
10.094 0.8 0.02 1.28   2040 1.04
11.073 6.8 0.13 1.37 1.03 1850 0.83
12.282 28.2 0.54 1.30 0.98 1136 0.66
13.058 95.6 1.82 4.99 0.64 2964 1.23
14.762 5126.3 97.50 3177.87 2.01 6348 1.13

主峰拖尾因子1.13,与聚集体分离度达2.01

图5.SRT-C-SEC-300-Plus分析双抗样品.jpg

图5.SRT-C SEC-300 Plus分析双抗样品

色谱柱:SRT-C SEC-300 Plus (5 μm, 300 Å, 7.8×300 mm)

流动相:100 mM PB+300 mM NaCl, pH 7.0

流速:0.5 ml/min

检测器:UV280 nm

样品:双抗(10 mg/mL)

进样量:5 μL

RT (min) 峰面积 (mAU) 峰面积 % p/v 比 USP 分离度 USP 塔板数 拖尾
11.039 20.7 0.23 1.33   2809 1.70
12.764 139.9 1.55 9.45 1.73 1910 1.21
14.658 8893.6 98.23 867.04 1.91 5138 1.10

主峰拖尾因子1.10,与聚集体分离度达1.91

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图6. SRT-C SEC-300 Plus vs SRT-C SEC-300分析对比

色谱柱:SRT-C SEC-300 Plus (5 μm, 300 Å, 7.8×300 mm)

流动相:50 mM PB+250 mM KCl, pH 6.2

流速:0.5 ml/min

检测器:UV280 nm

样品:Rituximab (1mg/mL)

进样量:100 μL

色谱柱 主峰拖尾 聚集体分离度 主峰柱效
SRT-C SEC-300 1.23 1.47 5240
SRT-C SEC-300 Plus 1.16 1.43 5948

相较于SRT-C SEC-300色谱柱,SRT-C SEC-300 Plus分析该单抗样品,色谱峰对称性更优,改善拖尾

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图7.SRT-C SEC-300 Plus vs Vendor

两款色谱柱对比,SRT-C SEC-300 Plus分析双抗样品,分离效果相当。

色谱柱:SRT-C SEC-300 Plus (5 μm, 300 Å, 7.8×300 mm)

流动相:50 mM PB+250 mM KCl, pH 6.2

流速:0.5 ml/min

检测器:UV280 nm

样品:双抗 (2 mg/mL)

进样量:25 μL

SRT-C SEC Plus色谱柱技术参数表

固定相 SRT-C SEC-100 Plus SRT-C SEC-150 Plus SRT-C SEC-300 Plus
基质 球形、高纯度硅胶 球形、高纯度硅胶 球形、高纯度硅胶
粒径 5 µm 5 µm 5 µm
孔径 ~100 Å ~150 Å ~300 Å
蛋白质分子量范围 100 - 100,000 500 - 150,000 5,000 - 1,250,000
pH耐受范围 2-8.5 (短期pH 8.5-9.5) 2-8.5 (短期pH 8.5-9.5) 2-8.5 (短期pH 8.5-9.5)
最大耐受压力/psi 3500 psi (常规2,000 PSI) 3500 psi (常规2,000 PSI) 3500 psi (常规2,000 PSI)
温度 最佳10-30°C 最佳10-30°C 最佳10-30°C
适用流动相 兼容多数水相缓冲液,如磷酸盐、醋酸盐等 兼容多数水相缓冲液,如磷酸盐、醋酸盐等 兼容多数水相缓冲液,如磷酸盐、醋酸盐等
反压 (psi for a 7.8x300 mm) ~ 700 ~ 700 ~ 700
盐浓度范围 20 mM - 2.0 M 20 mM - 2.0 M 20 mM - 2.0 M
性能特点
订购信息
SRT-C SEC Plus
产品名称 孔径 粒径 规格 订购货号
SRT-C SEC-300 Plus 300Å 5µm 7.8 mm x 300 mm 235301-7830
SRT-C SEC-300 Plus 300Å 5µm 7.8 mm x 150 mm 235301-7815
SRT-C SEC-150 Plus 150Å 5µm 7.8 mm x 300 mm 235151-7830
SRT-C SEC-150 Plus 150Å 5µm 7.8 mm x 150 mm 235151-7815
SRT-C SEC-100 Plus 100Å 5µm 7.8 mm x 300 mm 235101-7830
SRT-C SEC-100 Plus 100Å 5µm 7.8 mm x 150 mm 235101-7815
柱前过滤器
产品名称 规格 订购货号
柱前过滤器(不含滤片) 0.5µm、2µm滤片通用 102000-P355(PEEK)
102000-S355(不锈钢)
柱前过滤器中滤片 4.6mm, 2.0µm, PEEK
4.6mm, 2.0µm, SS
102001-P355
102001-S355
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