重组胶原蛋白纯化“明星产品”—Agarosix MC75/45-MMC
重组胶原蛋白是采用基因工程技术在合适的宿主中表达并翻译的蛋白或类似胶原蛋白的多肽,相对于天然提取的胶原蛋白,具有批次间稳定、组分可控、生物安全性高和可编辑修饰等优点,广泛应用于美容护肤,皮肤、眼科修复与骨修复等医学保健领域。赛分科技复合离子交换填料Agarosix MC75/45-MMC纯化性能优越稳定,通用性强,已成功适用于I型、III型、Ⅴ型、XVII型等多种亚型的重组人源化胶原蛋白纯化,是重组胶原蛋白纯化的“明星之选”。
技术参数
填料特点
1 纯化性能优越稳定
分辨率高,耐盐性好,去色素效果好,纯化效率高,多个案例一步纯化后SEC纯度均在90%以上,有效节约成本
2 通用性强
适用于Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型、XⅤⅡ型等多种亚型的重组人源化胶原蛋白纯化
应用案例一
酵母表达的某Ⅲ型重组人源化胶原蛋白样品,关键杂质为降解蛋白、非目的蛋白等,上样载量为20 mg/mL,经一步Agarosix MC75-MMC纯化,纯度由71%提升至99.2%,一步收率可达79.2%。
对降解片段有非常优秀的去除效果
洗脱体积小,仅有2 CV
图1. Agarosix MC75-MMC纯化某Ⅲ型重组人源化胶原蛋白样品图谱
应用案例二
大肠杆菌表达的某重组胶原蛋白样品,分别用Agarosix MC45-MMC和Ni亲和填料进行纯化,Agarosix MC45-MMC相较于Ni亲和填料,电泳结果中降解片段去除效果更好;可一步达到纯度要求,无需衔接精纯步骤,色素去除效果更佳,成本更可控。
图2. Agarosix MC45-MMC与Ni亲和填料纯化纯化某重组胶原蛋白样品对比
重组胶原蛋白纯化工艺
重组胶原蛋白的主要表达体系为大肠杆菌和酵母,其典型杂质包括宿主蛋白、降解片段、宿主核酸,以及大肠杆菌表达体系中需重点关注的内毒素。基于实际应用案例,赛分科技设计了以下纯化工艺方案(如图3):对于带His标签的大肠杆菌表达产物,首选Ni亲和层析进行捕获;不含标签的产物通常选用离子交换层析或复合层析等富集目标蛋白,若样品中存在较多降解片段,可增加疏水层析精纯步骤;部分样品选用一步疏水层析在盐浓度较低的情况下也能保持高分辨率和高载量;最终采用阴离子交换层析有效去除内毒素,确保终产物纯度。
图3. 重组胶原蛋白纯化工艺示意图
推荐填料及订购信息
注:包装规格为1 L,5 L, 10 L, 50 L,预装柱规格为1 mL, 4.2 mL, 5 mL
互动有礼
如需Agarosix MC75/45-MMC及以上填料,请扫描下图二维码,填写问卷信息申请试用装测试,并可参与问卷抽奖活动。
关于赛分科技(股票代码:688758.SH)
赛分科技致力于开发和生产用于生物大分子等药物分离纯化的液相色谱材料,历经二十余年在色谱层析领域的深耕,已发展成为集研发、生产和全球销售为一体的实业型企业,形成中美两地双研发、双生产模式,服务全球客户超5000家。公司主要产品为色谱层析介质、液相色谱柱,为全球生物制药企业提供从药品研发、临床前(Pre-IND)到临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期、生产以及质控全周期全流程分析色谱和工业纯化解决方案。