血液制品是指以健康人血液为原料，采用生物学工艺、分离纯化技术，也可结合生物合成技术制备的生物活性制剂，部分相关物质还可通过植物提取途径探索替代来源。其主要分为白蛋白类、免疫球蛋白类、凝血因子类等。作为临床救治的关键医疗资源，其在危重症抢救、遗传病治疗、自身免疫疾病管理及传染病防控中发挥着不可替代的作用。但由于原料的人源性特征和潜在传染性风险，血液制品的有效性与安全性始终是行业关注焦点。为助力血液制品关键质量属性的精准评估，文中对血液制品分析中常用的HPLC方法及相关色谱柱产品进行了整理，旨在为方法开发与色谱柱筛选提供清晰、实用的参考指南。

本文内容涵盖色谱柱选择指南、应用案例、产品使用指南等，欢迎查阅!

血液制品色谱柱选择指南

白蛋白类

案例1. SRT-C SEC-300色谱柱分析人血白蛋白样品分子大小变异体

Column: SRT-C SEC-300 (5 µm, 300 Å, 7.8×600 mm)

Mobile phase: 0.2 M磷酸盐缓冲液, pH 7.0+1% IPA

Flow rate: 0.6 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 人血白蛋白国家参考品

图1. SRT-C SEC-300分析人血白蛋白国家参考品图谱

案例2. SRT SEC-300 Excel色谱柱分析人血白蛋白样品分子大小变异体

Column: SRT-C SEC-300 (5 µm, 300 Å, 7.8×300 mm)

Mobile phase: 100 mM K2HPO4, pH 7.0

Flow rate: 0.6 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 10 µL

Sample: 人血白蛋白样品 (1.6 mg/mL)

图2. SRT SEC-300 Excel分析人血白蛋白样品图谱

案例3. Unix-C SEC 300色谱柱分析人血白蛋白和紫杉醇样品

Column: Unix-C SEC 300 (1.8 µm, 300 Å, 4.6×150 mm)

Mobile phase: 100 mM K2HPO4, pH 7.0

Flow rate: 0.4 mL/min

Detector: UV 228 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 人血白蛋白偶联紫杉醇供试品

图3. Unix-C SEC 300人血白蛋白样品分析图谱

案例4. Bio-C4色谱柱分析人血白蛋白样品含量

Column: Bio-C4 (3 µm, 300 Å, 4.6×150 mm)

Mobile phase: A: H2O 含 0.1% TFA

B: ACN 含 0.1% TFA

Flow rate: 1.0 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 40 °C

Injection volume: 5 µL

Sample: 人血清白蛋白样品

图4. Bio-C4分析人血清白蛋白样品图谱

案例5. Proteomix SAX色谱柱分析白蛋白样品电荷异质体

Column: Proteomix SAX-NP5 (5 µm, 4.6×250 mm)

Mobile phase: A: 20 mM HEPES, pH 7.5

B: 20 mM HEPES+1 M NaCl, pH 7.5

Flow rate: 0.5 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 30 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 白蛋白样品(5 mg/mL)

图5. Proteomix SAX-NP5分析白蛋白样品图谱

例6. Proteomix POR20-ConA色谱柱分析白蛋白样品中残留糖蛋白含量

Column: Proteomix POR20-ConA (20 µm, 2000 Å, 4.6×50 mm)

Mobile phase: A: 50 mM Sodium Acetate+0.2 M Sodium Chloride+1 mM CaCl2+1 mM MgCl2, pH 5.3

B: A+100 mM alpha-methyl-mannopyranoside

Flow rate: 1.0 mL/min

Detector: UV 403 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 5 µL

Sample: 植物源人血清白蛋白标准品 (3.4 mg/mL)

图6. Proteomix POR20-ConA分析白蛋白样品中残留糖蛋白图谱

针对以人血白蛋白为主的白蛋白类样品，基于不同分离原理开展多维度检测分析。采用SRT-C SEC-300可有效分离多聚体、二聚体与单体，适用于聚体含量分析;采用Proteomix SAX-NP5阴离子交换色谱柱，能够将酸区、单体、碱区分离，适用于电荷异质体分析;采用Bio-C4能够精准分离主峰与相关杂质;采用Proteomix POR20-ConA亲和色谱柱，定量测试残留糖蛋白，线性相关系数R2=0.9997，线性关系良好。

免疫球蛋白类

案例7. SRT-C SEC-300色谱柱分析静注人免疫球蛋白分子大小变异体

Column: SRT-C SEC-300 (5 µm, 300 Å, 7.8×600 mm)

Mobile phase: 0.2 M 磷酸盐缓冲液, pH 7.0+1% IPA

Flow rate: 0.6 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 静注人免疫球蛋白(pH4)

图7. SRT-C SEC-300分析静注人免疫球蛋白(pH4)样品图谱

案例8. SRT-C SEC-300色谱柱分析破伤风免疫球蛋白分子大小变异体

Column: SRT-C SEC-300 (5 µm, 300 Å, 7.8×600 mm)

Mobile phase: 0.2 M 磷酸盐缓冲液, pH 7.0+1% IPA

Flow rate: 0.6 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 破伤风免疫球蛋白

图8. SRT-C SEC-300分析破伤风免疫球蛋白样品图谱

采用粒径5 μm，7.8×600 mm规格的SRT-C SEC-300色谱柱测定静注人免疫球蛋白(pH4)、破伤风免疫球蛋白样品，主峰与片段的分离度均>1.5。

凝血因子类

案例9. Zenix-C SEC-300色谱柱分析人凝血因子VIII分子大小变异体

Column: Zenix-C SEC-300 (3 µm, 300 Å, 7.8×300 mm)

Mobile phase: 20 mM Tris+300 mM NaCl+4 mM CaCl2, pH 7.4

Flow rate: 0.5 mL/min

Detector: FLD, Ex=280 nm, Em=340 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 重组人凝血因子Ⅷ冻干制品

图9. Zenix-C SEC-300分析人凝血因子VIII样品图谱

采用Zenix-C SEC-300对人凝血因子VIII样品进行分析，能够有效分离聚体、片段，以达到评估样品纯度和稳定性监控的目的。

订购信息

*如需了解更多产品信息欢迎联系我们

产品使用指南

该内容介绍血液制品分析涉及的液相色谱柱产品的活化、清洗、流动相配置等，信息将持续更新。

联系我们

公司网址：https://www.sepax-tech.com.cn

色谱柱垂询：18913107255(微信同号)

色谱柱试用申请：扫描下方二维码