激素是指体内的某一细胞、腺体或者器官所产生的可以影响机体内其他细胞活动的化学物质。根据化学结构分类，主要分为胺类激素、多肽与蛋白质类激素、脂类激素等。本文对部分多肽与蛋白类激素药物分析中常用的HPLC方法及相关色谱柱产品进行了整理，为该类样品分析方法开发与色谱柱筛选提供清晰、实用的参考指南。

本文内容涵盖色谱柱选择指南、应用案例、产品使用指南等，欢迎查阅!

激素色谱柱选择指南

重组人生长激素类

案例1. SRT-C SEC-150色谱柱分析人生长激素样品含量

Column: SRT-C SEC-150 (5 µm, 150 Å, 7.8×300 mm)

Mobile phase: 63 mM 磷酸盐缓冲液, pH 7.0+5% IPA

Flow rate: 0.6 mL/min

Detector: UV 214 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 人生长激素标准品 (1 mg/mL)

图1. SRT-C SEC-150分析人生长激素标准品图谱

案例2. Bio-C4色谱柱分析人生长激素原液相关蛋白质含量

Column: Bio-C4 (5 µm, 300 Å, 4.6×250 mm)

Mobile phase: 0.05 M Tris, pH 7.5+29%正丙醇

Flow rate: 0.5 mL/min

Detector: UV 220 nm

Column temperature: 45 °C

Injection volume: 10 µL

Sample: 人生长激素原液 (2 mg/mL)

图2. Bio-C4分析人生长激素原液样品图谱

案例3. Bio-C18色谱柱分析人生长激素注射液成品相关蛋白质含量

Column: Bio-C18 (7 µm, 1000 Å, 4.0×250 mm)

Mobile phase: A: 取硫酸铵82.6 g和磷酸二氢钠34.5 g, 加水2950 mL溶解后再加入高氯酸25.0 mL和乙腈2000 mL, 混匀后加水稀释至5000 mL

B: ACN: H2O=4: 1

Flow rate: 1.0 mL/min

Detector: UV 215 nm

Column temperature: 45 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 人生长激素注射液成品

图3. Bio-C18分析人生长激素注射液成品图谱

案例4. Bio-C8色谱柱分析人生长激素样品肽图

Column: Bio-C8 (300 Å, 5 µm, 4.6×250 mm)

Mobile phase: A: 0.1% TFA in H2O

B: 0.1% TFA in 90% ACN

Flow rate: 1.0 mL/min

Detector: UV 214 nm

Column temperature: 35 °C

Injection volume: 100 µL

Sample: 人生长激素 (2 mg/mL)

图4. Bio-C8分析人生长激素样品肽图图谱

重组人生长激素的液相分析是主要包括肽图分析、含量测定和相关蛋白等杂质分析。采用SRT-C SEC-150能够有效分离聚体、单体、片段，便于准确定量;采用Bio-C4、Bio-C8、Bio-C18，按照2025年版《中国药典》方法测定相关蛋白含量及肽图分析，以确保药物纯度与安全性。

重组人促卵泡激素类

案例5. Bio-C4色谱柱分析重组人促卵泡激素样品总氧化亚基含量

Column: Bio-C4 (5 µm, 300 Å, 4.6×250 mm)

Mobile phase: A: 200 mM 磷酸钾盐缓冲液, pH 2.5

B: ACN: H2O=80: 20

Flow rate: 1.0 mL/min

Detector: UV 210 nm

Column temperature: 30 °C

Injection volume: 100 µL

Sample: 重组人促卵泡激素系统适用性溶液

图5. Bio-C4分析重组人促卵泡激素系统适用性样品图谱

按照2025年版《中国药典》方法测定重组人促卵泡激素的总氧化亚基含量，结果表明β亚基早于α亚基出峰，β亚基峰柱效1551，且与β亚基氧化峰峰谷比达5.62，满足药典要求。

白介素类

案例6. SRT-C SEC-150色谱柱分析人白介素样品分子大小变异体

Column: SRT-C SEC-150 (5 µm, 300 Å, 7.8×300 mm)

SRT-C SEC-150 (5 µm, 300 Å, 7.8×50 mm)

Mobile phase: 45%乙腈水含0.1% TFA

Flow rate: 0.7 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 3 µL

Sample: 人白介素

图6. SRT-C SEC-150分析人白介素样品图谱

案例7. SRT-C SEC-150色谱柱分析白介素样品分子大小变异体

Column: SRT-C SEC-150 (5 µm, 300 Å, 7.8×300 mm)

Mobile phase: 150 mM PB, pH 7.0

Flow rate: 0.8 mL/min

Detector: UV 280 nm

Column temperature: 25 °C

Injection volume: 20 µL

Sample: 白介素

图7. SRT-C SEC-150分析白介素样品图谱

采用SRT-C SEC-150对白介素样品进行分析，能够实现聚集体、单体、片段有效分离，以便进行药物纯度检测。为延长色谱柱寿命，建议在分析测试中连接保护柱。

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产品使用指南

该内容介绍激素类药物分析涉及的液相色谱柱产品的活化、清洗、流动相配置等，信息将持续更新。

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